1实验室管理

       实验室是精液检查、处理、贮存场所。为了生产出优质的、符合输精要求的精液，一定把好质量关，保证精液的活力不低于0.7，92h之内精液不受影响，所以规范如下：

1.1室内清洁、干净、卫生。

1.2非工作人员不准入内，包括采精人员及饲养员。

1.3注意仪器的使用和保养，如高压蒸气灭菌器，双蒸水器。

1.4各种电器应设备用插孔，除冰箱外、水浴锅等要人走断电，干

燥箱无人时勿高于100^。C。

1.5对所有器皿要求用水、洗衣粉清洗干净，并消毒处理后使用。

1.6稀释液的配制、精检及稀释、分装一定按规程操作。

1.7采精室与实验室之间的传递口，只有在传递精液时开启。

1.8下班后，对水龙头、电源是否关好，做到万无一失，确保安全。

2采精操作规程

2.1采精员一手带双层手套，另一手持37^。C采精杯，收集精液。

2.2饲养员赶出相应的配种公猪，用0.1%PP消毒，挤出包皮积液后用清水洗净。

2.3待种公猪爬跨假畜，采精员脱去一手的一层手套，将公猪龟头引入空拳中。

2.4用于紧握伸出的公猪的阴茎螺旋状龟头，顺其公猪的前冲力，将阴茎的“S”状拉直，紧握防至阴茎旋转。

2.5用四层纱布或二层采精滤纸收集浓份精液，最初射出的

精液不可取，取中间部分，后面的精状液也可不取，射精过程5~7分钟。

2.6采精员应注意安全，采集室应有安全角。

2.7对采集室应设有水管，保证清洁。

2.8采精后不准打公猪。

2.9采精率：成年♂为2次/周，青少年♂1次/周，最好固定公

猪的采精频率。

2.10公猪采精的调教：A：后备公猪7月龄开始进行调教。B：每次调教时间不超过15分钟，最好原圈调教。C：一旦采精成功，应再多采精2~4次。D：对台畜可涂有公猪的精液和母猪的阴道分泌物。E采精人员一定要有耐心，勿打骂公猪。

3稀释液配制规程

3.1对稀释剂应用双蒸水机，去离子水勿用蒸溜水。

3.2对稀释粉勿用过期的，按说明书用量进行。1000^ml/包。

3.3对稀释好的稀释液应存放6个小时后应用。并贴上标签，品

名配制日期、时间、人名等记录。

4精液的品质检查及操作

4.1精液量：以电子天平称量精液，按每ml每克计算。

4.2颜色：为灰色或乳白色，精子密度高则色泽浓。透明度愈低。

如有绿色或黄色证明有尿液。带有红色，红褐色，精液中含有血液，对带有异色的精液一律不用。

4.3气味：猪精液带有特殊腥味，如有异味，应废弃。

4.4PH值：以PH试纸计量，详见说明书。

4.5精子活率检查、活率是呈直线运动的精子的百分率，在显微镜下观察精子的活率，一般按十级分制。鲜精活率不低于0.7。

4.6精子的密度：指每ml精液所含的精子个数，是确定稀释倍数的重要指标，血C计数法，1.以微量移液器。取100微升，3%Nacl900微升并混匀之10倍。2.在血C计数室上放一盖玻片，取1滴精液放入计数板槽中，靠虹吸纳入计数室内。3.在倍镜下观5个方格中的总数乘以50万，即原有精液密度，详见说明书。

4.7做好精液品质、品种、时间等相关记录。

5精液的稀释操作

5.1精液采集后尽快稀释，原精一般不过30S。

5.2未经品质检查或镜查不合格不稀释。

5.3稀释液与精液要求同温，两者最多不相差1C^。，即稀释液加热至33^。C-37^。C，以精液温度为标准。调节稀释液的温度。

5.4稀释时，将BTS沿杯壁慢慢加入，后用玻璃棒轻轻搅拌。

5.5作高倍稀释时，应先进行低倍稀释（1：1~2）稍后再加入余液。

5.6稀释液倍数确定，活率<=0.7，精子总量为40亿个，有效精子30亿，80~90ml，确定倍数。

5.7稀释后，稍加片刻再检活率是否合格，如同前一样，分装、保存，在此分装后，应片刻后纳入17^。C保存箱，用前镜检精液。

6输精操作

6.1次数 ： A：1次本交 1次人工   B： 2次人工

6.2时间：A断奶后3~6天发情经产猪，情期呆立后6~12小时进行第一次输精。B：后备♀和断奶7日以上的♀，发现呆立后即输精。

6.3精检：取17^。C存精镜检后输精。

6.4将情合理起至配种栏，使♀十♂相见前能接触。试情♂赶至。

6.5用0.1%PP精洗外阴，后用清水冲洗。外阴并用纸擦干。

6.6从密封代取输精管。前3/2不能污染，末端涂润滑液。

6.7将精管呈45^。插入生殖内部，当有阻力时，缓慢旋转。

6.8取出相应的精液，剪去瓶嘴，插入输精管上进行输精。

6.9用针头在输精瓶底部扎一小孔，抚摸猪乳房及外阴，压背剌激，使子宫收缩产生负压，自动吸收精液。

6.10使瓶高低来控制输精时间，一般3~5分钟，输完后使一端折弯插入瓶口内，等3~5分钟把管取出。

注意：从17^。C精保箱中取出的精液无需37^。C升温。取出后即可输精，但检查需预热37^。C。经产♀用海绵头一次输精管，后备猪用螺旋头输精管，♀猪发情期应输精两次。间隔时间8小时。

7精液的常温保存操作

7.1精液稀释后，检查活率，无明显下降，按80~90ml分装。对后备可用100ml。

7.2瓶上加封盖，并加上♂品种、耳号、时间等。

7.3置22^。C~25^。C室温30分钟—1小时再放入17^。C冰箱。

7.4保存过程隔12小时混匀精液1次，防止沉淀死亡。

7.5减少保存箱的开关次数，以免温度对精子有影响。